案例:加裂解液直接匀浆(使用氧化锆珠提取组织RNA)
1、取适量组织装入离心管,组织尽量剪碎成小块;
2、在离心管中加入氧化锆珠数颗(一次性使用);
3、组织研磨仪研磨参数设置为一定转速,研磨时间为2~5min(不同组织研磨时间不同,脑1min,肝脏、脾脏和肾脏2min、肺脏比较难研磨需3~5min,可能更长,中间应停顿1~2次防止温度过高,研磨前最好先用液氮或放置在-80度冰箱预冷);
案例2:先匀浆,再取一定量液体加裂解液进行核酸抽提,适用提取小鼠组织中的病毒的核酸
1、取适量组织装入离心管,组织尽量剪碎成小块,样品量较多时使用大离心管;
2、在离心管中加入氧化锆珠数颗,使用大离心管时,可以将氧化锆珠数量增加;
3、加入适量的灭菌PBS或生理盐水,总体积为离心管单管体积的1/3~1/2为好,盖好管盖,装入鼎昊源TL组织研磨仪适配器中,安装上机(研磨前最好先用液氮或放置在-80度冰箱预冷)。
4、组织研磨仪研磨参数设置为一定转速,研磨时间为1~5min(不同组织研磨时间不同,脑1min,肝脏、脾脏和肾脏2min、肺脏比较难研磨需3~5min,可能更长,中间应停顿1~2次防止温度过高),若研磨不充分,可以继续研磨到充分为止;
5、一定温度、转速,离心数分钟;
金瑞氧化锆珠